第112章 这操作是高中生？（2/2）

卢俊嘉思考道：“可以加点三乙胺调节极性，或者换用氧化铝板……”

“用0.5%的乙酸乙酯胺溶液预饱和展开缸。”陈航同时开口，“或者在展开剂里加几滴三乙胺，中和硅胶表面的酸性位点。”

实验室里安静了一秒。

马荣真看着陈航，又问：“那如果产物紫外吸收很弱，显色不明显呢？”

“可以用碘缸显色，或者喷洒硫酸-乙醇溶液后加热。”陈航回答，“如果是含氮化合物，也可以用硝酸铈铵试剂。”

卢俊嘉感觉自己作为研究生的尊严正在被一个高中生按在地上摩擦。

马荣真点点头，没再说话，但嘴角似乎动了动。

两小时到了。陈航小心地将反应管从低温浴槽取出，溶液仍呈橙黄色，没有明显变化。

“现在淬灭反应。”卢俊嘉恢复教学状态，“把反应液倒入冰浴冷却的饱和氯化铵溶液中，要慢，边倒边搅拌。”

陈航照做。反应液与氯化铵溶液接触时发出轻微的“嘶嘶”声，冒出细小气泡。

“中和放热，冰浴能控制温度。”卢俊嘉说，“等不再冒气泡，说明酸基本中和完了。现在用乙酸乙酯萃取，知道为什么用乙酸乙酯吗？”

“乙酸乙酯对中等极性有机物溶解性好，与水不混溶，沸点适中便于后续旋蒸除去。”陈航一边将混合物转移进分液漏斗一边回答。

“正确。加20毫升，盖上塞子，倒置，缓慢摇晃……对，然后小心放气。”卢俊嘉指导着每个细节，“萃取三次，合并有机相。”

三次萃取后，陈航将合并的有机相倒入锥形瓶，加入无水硫酸钠干燥。

“硫酸钠用量要合适，太少干燥不彻底，太多吸附产物。”卢俊嘉说，“加一小勺，摇晃，如果硫酸钠结块说明还有水分，再加一点。”

陈航加入硫酸钠，摇晃后颗粒自由流动，没有结块。

“干燥完成。现在过滤，旋蒸除去溶剂。”卢俊嘉递过折叠好的滤纸和漏斗。

过滤，转移至圆底烧瓶，连接旋转蒸发仪。陈航设定水浴温度40°c，缓慢抽真空。溶剂在旋转的烧瓶内壁形成均匀液膜，迅速蒸发。

五分钟后，烧瓶底部留下约0.08克浅黄色油状物。

“粗产物。”卢俊嘉说，“现在柱层析纯化。柱子我已经装好了，200-300目硅胶，直径2厘米，高30厘米。你先检查装填是否均匀。”

陈航用手电筒从侧面照射色谱柱，硅胶填充均匀，没有断层或气泡。

“上样。用最少量的二氯甲烷溶解粗产物。”卢俊嘉递过一个小样品瓶，“溶解后，用滴管转移到柱子顶端，要慢，让样品在硅胶表面形成整齐的带。”

陈航的操作虽不熟练但很仔细，淡黄色样品溶液在硅胶顶端形成了一个宽约1.5厘米的整齐色带。

“好，现在洗脱。”卢俊嘉说，“先用纯石油醚冲一段，把极性最小的杂质洗下来。流速控制在每秒一滴左右。”

清澈的石油醚缓缓流下。十分钟后，柱子顶端出现了一条淡黄色的色带，缓慢向下移动。

“这是第一个组分，可能是原料或者极性很小的杂质。”卢俊嘉讲解道，“继续洗脱，等这个带出来，我们开始梯度增加乙酸乙酯比例。”

第一个色带完全洗脱后，陈航按卢俊嘉指导，将洗脱剂改为石油醚:乙酸乙酯=95:5。

“看，新的色带出现了，颜色更深，移动更慢。”卢俊嘉指着柱子，“这应该是目标产物，n-硝基-2-氨基吡啶极性比原料大，会在较高极性段洗脱。”

陈航小心收集每一管洗脱液，同时点tlc监测。当乙酸乙酯比例增加到15%时，tlc板上出现了一个新的斑点，rf值约0.3。

“目标馏分，第10到14管。”陈航将这几管合并，再次旋蒸。

得到约0.04克浅黄色固体。

“产率约40%。”陈航计算道，“第一次尝试，这个产率可以接受。”

他将产物分装到两个样品瓶中：“一瓶送核磁，一瓶送质谱。”